Reconstitution du LL-37 : quelle quantité d’eau bactériostatique

Une fiole de 5 mg de LL-37 reconstituée avec 2 mL d’eau bactériostatique donne une concentration de 2,5 mg/mL; avec 1 mL, elle donne 5 mg/mL. Le calcul dépend uniquement de la quantité contenue dans la fiole et du volume d’eau ajouté, de sorte que les chiffres ci-dessous s’appliquent à toute fiole de 5 mg.

Il n’existe pas de volume unique correct. Ajouter plus d’eau ne change pas la quantité contenue dans la fiole. Cela répartit la même quantité dans un plus grand volume, ce qui change le nombre d’unités de seringue correspondant à une quantité donnée. Les tableaux de cette page utilisent des volumes qui donnent des chiffres ronds sur une seringue U-100; d’autres volumes fonctionnent de la même façon, pourvu que la concentration obtenue soit inscrite sur la fiole.

Quelle quantité d’eau bactériostatique pour 5 mg de LL-37?

Une fiole de LL-37 de 5 mg est couramment reconstituée avec 2 mL d’eau bactériostatique, ce qui donne 2,5 mg/mL; 1 mL donne 5 mg/mL, 2,5 mL donnent 2 mg/mL et 5 mL donnent 1 mg/mL. Le tableau indique la quantité de LL-37 contenue dans chaque 0,1 mL de solution pour chaque volume. Ajouter plus d’eau ne change pas les 5 mg contenus dans la fiole; cela abaisse seulement la concentration.

Pour tout autre volume d’eau, entrez-le dans le calculateur de peptides de cette page, qui calculera la concentration.

Avant de choisir un plus grand volume, vérifiez que la fiole a assez d’espace libre pour le recevoir. Une seule fiole multidose d’eau bactériostatique suffit pour plusieurs fioles de recherche.

Lire la concentration sur une seringue U-100

Une seringue à insuline U-100 est graduée en unités, et 100 unités équivalent à 1 mL. Les unités correspondent donc aux millilitres multipliés par 100 : 0,1 mL équivaut à 10 unités et 0,25 mL à 25 unités. Une seringue de 0,5 mL compte 50 unités et une seringue de 0,3 mL en compte 30 sur la même échelle, avec des graduations plus fines qui facilitent la lecture des petits volumes.

Pour trouver le volume qui contient une quantité donnée, divisez la quantité par la concentration. À 2,5 mg/mL (une fiole de 5 mg avec 2 mL d’eau), le volume qui contient 0,5 mg est 0,5 divisé par 2,5, soit 0,2 mL, ou 20 unités. Le tableau ci-dessous applique le même calcul à quatre quantités arbitraires. Elles illustrent l’arithmétique, rien de plus.

À 5 mg/mL, concentration que donne la même fiole avec 1 mL d’eau, chaque volume du tableau change en proportion : un prélèvement de 0,5 mg mesure 10 unités au lieu de 20. Les volumes inférieurs à environ 0,1 mL sont difficiles à lire avec précision sur une seringue de 1 mL. Passez à une seringue de 0,3 mL ou de 0,5 mL, ou reconstituez avec plus d’eau pour que la même masse occupe un volume plus grand et plus lisible.

Ce qu’est le LL-37

Le LL-37 est la cathélicidine humaine : un peptide antimicrobien de 37 acides aminés, nommé d’après ses deux résidus de leucine initiaux, clivé à partir de la protéine précurseur hCAP18. Outre son activité antimicrobienne, il possède des propriétés immunomodulatrices et proangiogéniques, et la cicatrisation des plaies domine la recherche menée chez l’humain.

• Dans le premier essai chez l’humain, 34 participants présentant des ulcères veineux de jambe difficiles à guérir ont reçu du LL-37 topique ou un placebo pendant une phase de traitement de quatre semaines; les constantes de vitesse de cicatrisation à 0,5 et 1,6 mg/mL étaient environ six et trois fois plus élevées que sous placebo, la surface moyenne des ulcères a diminué de 68 % et 50 %, et aucune préoccupation d’innocuité n’a été relevée (Grönberg et al., 2014).
• L’essai de phase IIb HEAL LL-37 mené auprès de 148 patients a montré que le LL-37 était bien toléré et sûr aux deux concentrations testées, et une analyse a posteriori a révélé une amélioration statistiquement significative de plusieurs paramètres de cicatrisation chez les patients présentant de grands ulcères d’au moins 10 cm² (Mahlapuu et al., 2021).
• Chez des patients atteints d’ulcères veineux de jambe, les concentrations sériques de LL-37 étaient fortement associées aux taux de cicatrisation, alors que les taux de 25-hydroxyvitamine D ne l’étaient pas (Krejner et al., 2017).
• Le LL-37 synthétique n’a présenté aucun clivage apparent après jusqu’à 24 heures à 37 °C dans le liquide de plaie d’ulcères veineux de jambe non cicatrisants, un résultat pertinent quant à la stabilité du peptide dans un milieu riche en protéines (Grönberg et al., 2011).

La fiole de LL-37

Le LL-37 est couramment offert dans les catalogues de recherche sous forme de poudre lyophilisée en fiole de 5 mg. Vistara Labs n’offre pas actuellement le LL-37, mais vous pouvez en faire la demande : communiquez avec nous et nous nous le procurerons pour vous. Le calculateur de cette page fonctionne pour n’importe quelle fiole. Vistara Labs fournit le TB-500, un autre peptide étudié en recherche sur la réparation tissulaire, en fiole de 10 mg.

Technique de reconstitution

Laissez la fiole atteindre la température ambiante, désinfectez les deux bouchons et faites couler lentement l’eau mesurée le long de la paroi intérieure de la fiole plutôt que directement sur la poudre. Faites tourner ou inclinez doucement la fiole jusqu’à ce que la galette se dissolve, sans jamais agiter, et laissez quelques minutes à la poudre restante pour se dissoudre. Inscrivez sur la fiole la date et la concentration, puis gardez-la au réfrigérateur entre 2 et 8 °C, à l’abri de la lumière. La méthode complète, avec la raison de chaque étape, est décrite dans comment reconstituer des peptides avec de l’eau bactériostatique.

Pourquoi la solution doit être limpide

Un LL-37 correctement reconstitué forme une solution limpide et incolore. Un aspect trouble, des filaments ou un gel qui ne se disperse pas signifient généralement que l’eau a été ajoutée trop vite ou que la fiole a été agitée; un voile qui apparaît plus tard indique une conservation au chaud ou à la lumière. Les causes sont expliquées dans pourquoi les peptides gélifient ou deviennent troubles.

De l’eau bactériostatique, pas de l’eau stérile

L’eau bactériostatique est de l’eau stérile contenant 0,9 % d’alcool benzylique, un agent de conservation qui permet de ponctionner plus d’une fois une fiole réfrigérée; l’eau stérile ordinaire est destinée à un seul prélèvement. La différence est expliquée dans l’eau bactériostatique expliquée.

Questions fréquentes

Combien d’eau bactériostatique pour une fiole de LL-37 de 5 mg?

Une fiole de LL-37 de 5 mg est couramment reconstituée avec 2 mL d’eau bactériostatique, ce qui donne 2,5 mg/mL; 1 mL donne 5 mg/mL, 2,5 mL donnent 2 mg/mL et 5 mL donnent 1 mg/mL. Ajouter plus d’eau ne change pas les 5 mg contenus dans la fiole; cela abaisse seulement la concentration.

Pour combien de fioles de 5 mg une fiole d’eau bactériostatique suffit-elle?

Une seule fiole multidose d’eau bactériostatique suffit pour plusieurs fioles de recherche. Avant de choisir un plus grand volume, vérifiez que la fiole de peptide a assez d’espace libre pour le recevoir.

Combien d’unités d’une seringue U-100 contiennent 0,5 mg à 2,5 mg/mL?

À 2,5 mg/mL (une fiole de 5 mg avec 2 mL d’eau), le volume qui contient 0,5 mg est 0,5 divisé par 2,5, soit 0,2 mL, ou 20 unités. Les unités correspondent aux millilitres multipliés par 100; 0,1 mL équivaut donc à 10 unités. Les quantités de cette page illustrent uniquement l’arithmétique.

À quoi doit ressembler du LL-37 reconstitué?

Un LL-37 correctement reconstitué forme une solution limpide et incolore. Un aspect trouble, des filaments ou un gel qui ne se disperse pas signifient généralement que l’eau a été ajoutée trop vite ou que la fiole a été agitée; un voile qui apparaît plus tard indique une conservation au chaud ou à la lumière. Plus de détails sur les causes dans pourquoi les peptides gélifient ou deviennent troubles.

Puis-je utiliser de l’eau stérile au lieu de l’eau bactériostatique?

Seulement pour une fiole qui ne sera ponctionnée qu’une fois. L’eau bactériostatique est de l’eau stérile contenant 0,9 % d’alcool benzylique, un agent de conservation qui permet de ponctionner plus d’une fois une fiole réfrigérée; l’eau stérile ordinaire est destinée à un seul prélèvement. Détails dans l’eau bactériostatique expliquée.

Comment conserver une fiole de LL-37 reconstituée?

Au réfrigérateur entre 2 et 8 °C, à l’abri de la lumière, avec la date et la concentration inscrites sur la fiole. Les fioles lyophilisées non ouvertes sont gardées au froid et à l’abri de la lumière jusqu’à leur utilisation. Le guide complet de conservation est comment conserver les peptides de recherche.

Vistara Labs vend-elle du LL-37?

Vistara Labs n’offre pas actuellement le LL-37, mais vous pouvez en faire la demande : communiquez avec nous et nous nous le procurerons pour vous. Le calculateur de cette page fonctionne pour n’importe quelle fiole.

Faire le calcul pour une autre fiole ou une autre concentration

Notre calculateur de peptides s’ouvre préréglé pour une fiole de 5 mg avec 2 mL d’eau et indique le prélèvement de 0,5 mg, soit 20 unités, sur un schéma de seringue. Modifiez la taille de la fiole, le volume d’eau, la quantité ou la seringue, et il refait le calcul.

Produits : eau bactériostatique.

À lire aussi. Comment reconstituer des peptides, comment conserver les peptides de recherche et l’eau bactériostatique expliquée.

Sources : Grönberg A et al. Treatment with LL-37 is safe and effective in enhancing healing of hard-to-heal venous leg ulcers: a randomized, placebo-controlled clinical trial. Wound Repair Regen. 2014. PMID 25041740. Mahlapuu M et al. Evaluation of LL-37 in healing of hard-to-heal venous leg ulcers: A multicentric prospective randomized placebo-controlled clinical trial. Wound Repair Regen. 2021. PMID 34687253. Krejner A et al. LL-37 but Not 25-Hydroxy-Vitamin D Serum Level Correlates with Healing of Venous Leg Ulcers. Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 2017. PMID 27663530. Grönberg A et al. Stability of the cathelicidin peptide LL-37 in a non-healing wound environment. Acta Derm Venereol. 2011. PMID 21547341.