Comment conserver les peptides de recherche : flacons lyophilisés et solutions
Les peptides de recherche lyophilisés se conservent au froid, au sec et à l’abri de la lumière : réfrigérés entre 2 et 8 °C pendant les semaines où ils seront utilisés, ou congelés à moins 20 °C pour une conservation plus longue, le flacon scellé et protégé de la lumière. Une fois qu’un flacon a été reconstitué avec de l’eau bactériostatique, il est gardé au réfrigérateur entre 2 et 8 °C, jamais congelé puis décongelé à répétition, et utilisé dans la fenêtre multidose que permet l’agent de conservation, fixée à 28 jours par la convention USP pour les contenants multidoses ouverts. Ces deux règles couvrent presque tous les flacons d’un catalogue de recherche; le reste de cette page présente le raisonnement et les exceptions.
Comment conserver un flacon scellé et non ouvert?
Un peptide lyophilisé (séché par congélation) est un gâteau sec qui ne contient presque pas d’eau, ce qui le rend stable. Ses ennemis sont la chaleur, la lumière et l’humidité, dans cet ordre. La réfrigération entre 2 et 8 °C est la norme de travail pour les flacons qui seront utilisés au cours des semaines suivantes; un congélateur à moins 20 °C est la norme pour les flacons conservés pendant des mois. Gardez le flacon dans sa boîte ou dans un contenant fermé afin que la poudre ne soit pas exposée à la lumière, et gardez le bouchon au sec.
Les guides de manipulation des fabricants de peptides (Bachem, Sigma-Aldrich et GenScript en publient tous un) s’entendent sur les mêmes points : conserver le matériel lyophilisé au froid et au sec, le garder scellé, et laisser un flacon froid revenir à la température ambiante avant de l’ouvrir. Cette dernière étape compte plus qu’il n’y paraît : un flacon ouvert dès sa sortie du réfrigérateur attire de la condensation sur la poudre froide, et l’eau est justement la seule chose qu’un gâteau lyophilisé ne doit pas rencontrer avant le moment prévu.
Quelques jours à température ambiante pendant l’expédition nuisent-ils au peptide?
Non. Les peptides lyophilisés tolèrent les quelques jours de transport à température ambiante qu’implique une livraison au pays, ce qui explique pourquoi les fournisseurs de produits de recherche les expédient sans blocs réfrigérants. Les commandes de Vistara Labs voyagent au Canada par Postes Canada, généralement en un à trois jours par Xpresspost et en trois à cinq jours par service standard, et les flacons vont au réfrigérateur dès leur arrivée. Ce que la poudre ne doit pas subir, c’est une voiture surchauffée, un rebord de fenêtre ou un radiateur; c’est la chaleur pendant des jours, et non des heures, qui la dégrade.
Comment conserver un flacon reconstitué?
Dès que l’eau bactériostatique est ajoutée, le peptide est en solution et le compte à rebours commence. Conservez la solution au réfrigérateur entre 2 et 8 °C, debout, à l’abri de la lumière, en désinfectant le bouchon avant chaque accès. Ne congelez pas un flacon reconstitué qui sera ouvert de nouveau : les cycles de congélation et de décongélation sont le moyen le plus rapide de faire s’agréger un peptide en solution, et un flacon qui devient trouble ou présente des filaments après décongélation a généralement subi exactement cela. Si un grand volume doit être conservé longtemps, les laboratoires le divisent en aliquotes à usage unique et congèlent celles-ci une seule fois, à moins 20 °C, en ne décongelant chacune qu’au moment de l’utiliser.
Le chiffre de 28 jours provient de la pratique pharmaceutique, et non de la chimie des peptides : le chapitre général 797 de l’USP fixe une date limite d’utilisation de 28 jours pour un contenant multidose ouvert d’un produit avec agent de conservation, sauf indication contraire sur l’étiquette, et l’alcool benzylique à 0,9 % de l’eau bactériostatique est l’agent de conservation qui rend possible un flacon multidose. L’eau stérile ordinaire ne contient aucun agent de conservation, c’est pourquoi un flacon reconstitué avec celle-ci est considéré comme à accès unique. L’explication détaillée se trouve dans l’eau bactériostatique expliquée.
Quels peptides sont moins stables en solution?
La stabilité en solution dépend de la séquence. Les peptides contenant de la cystéine, de la méthionine ou du tryptophane sont sujets à l’oxydation; ceux qui contiennent de l’asparagine ou de la glutamine peuvent se désamider; une glutamine en position N-terminale peut se cycliser. Il est préférable de reconstituer les séquences comportant plusieurs de ces résidus en plus petits volumes, plus près du moment de l’utilisation, plutôt que de les garder en solution pendant des semaines. Les peptides de cuivre comme le GHK-Cu sont stables, mais sensibles à la lumière en solution; la couleur bleue provient du cuivre et la solution doit rester limpide. Un aspect trouble, des filaments visibles ou un gel qui ne se disperse pas signifient que la solution est jetée plutôt qu’utilisée; les causes sont expliquées dans pourquoi les peptides gélifient ou deviennent troubles.
Et l’eau bactériostatique elle-même?
Non ouverte, l’eau bactériostatique se conserve à température ambiante, à l’abri de la lumière, comme tout produit d’eau stérile. Une fois le bouchon percé, elle suit la même convention multidose de 28 jours que tout autre produit conservé à l’alcool benzylique. Elle ne doit pas être congelée, et un flacon devenu trouble ou présentant des particules est jeté. Un flacon de 10 mL permet de reconstituer cinq flacons de peptide de 10 mg à raison de 2 mL chacun; les volumes propres à chaque composé figurent dans le guide de reconstitution.
Vistara Labs fournit des peptides et de l’eau bactériostatique à titre de matériel de recherche en laboratoire. Les conditions de conservation décrites sur cette page expliquent comment les matériaux restent stables; elles ne constituent pas des instructions pour tout autre usage.
Questions fréquentes
Puis-je garder des peptides lyophilisés au congélateur?
Oui. Moins 20 °C est la norme pour conserver des flacons lyophilisés scellés pendant des mois. Laissez le flacon atteindre la température ambiante avant de l’ouvrir afin que de la condensation ne se forme pas sur la poudre.
Combien de temps un peptide reconstitué se conserve-t-il au réfrigérateur?
La convention multidose est de 28 jours après la première perforation du bouchon, d’après la règle de date limite d’utilisation de l’USP 797 pour les contenants multidoses avec agent de conservation. Il est préférable de reconstituer les peptides sensibles en raison de leur séquence en plus petits volumes, plus près du moment de l’utilisation.
Puis-je recongeler un flacon reconstitué?
Pas s’il doit être ouvert de nouveau. La congélation et la décongélation répétées font s’agréger les peptides en solution. Les laboratoires congèlent plutôt une seule fois des aliquotes à usage unique.
Le flacon doit-il être gardé à l’abri de la lumière?
Oui, avant comme après la reconstitution. La lumière dégrade plusieurs peptides avec le temps; la boîte dans laquelle le flacon est arrivé, ou un contenant fermé au réfrigérateur, suffit.
Est-ce un problème si le peptide est arrivé tiède?
Quelques jours à température ambiante pendant le transport ne nuisent pas à un peptide lyophilisé. Réfrigérez-le à l’arrivée et laissez-le revenir à la température ambiante avant de l’ouvrir.
Produits : eau bactériostatique et le catalogue de peptides de recherche. Les certificats d’analyse sont publiés sur la page Résultats de laboratoire.
